AndHider 小鼠单克隆抗体制备服务-青岛海德诚生物工程有限公司

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产品介绍：

1.抗原准备； 2.免疫Balb/C小鼠； 3.小鼠抗血清检测（WB/ELISA检测内源性蛋白）； 4.检测结果合格进行细胞融合及细胞株的筛选、亚克隆、建立稳定分泌抗体的细胞株； 5.细胞株分泌抗体重链（Fcγ）亚型鉴定； 6.抗体扩大生产、制备腹水以及Protein A/G纯化。

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一、服务内容

1.抗原准备；

2.免疫Balb/C小鼠；

3.小鼠抗血清检测（WB/ELISA检测内源性蛋白）；

4.检测结果合格进行细胞融合及细胞株的筛选、亚克隆、建立稳定分泌抗体的细胞株；

5.细胞株分泌抗体重链（Fcγ）亚型鉴定；

6.抗体扩大生产、制备腹水以及Protein A/G纯化。

二、抗原要求

1.蛋白抗原：蛋白总量>4mg、浓度＞1mg/ml、纯度>85%、分子量>10KDa；

2.多肽抗原：多肽重量>4mg、纯度>95%；

3.细菌等抗原：咨询。
三、收费标准

步骤	内容	时间
免疫	三次免疫后（效价达不到融合要求继续免疫）测尾血效价	10周	免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最终达到融合效价>1:10000	咨询
融合	采用已优化的条件进行高效融合	1天	取脾脏分离成单细胞与对数期的SP2/0按5：1混合，进行细胞融合，20%胎牛血清，HAT选择培养基，铺10块板	咨询
上清检测	融合7天后，ELISA检测，用检测抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB显色	1天	阴性（正常培养基）OD<0.1阳性OD>0.5视为阳性孔	咨询
亚克隆	对阳性孔采用有限稀释法进行亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性	3周	ELISA检测挑选OD值高的细胞孔，进行后续亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性	咨询
定株	阳性稳定的孔进行扩大培养	1周	扩大培养上清，按客户要求进行功能检测（WB/ELISA/IHC），满足客户要求后，将应客户要求交付3株细胞（每株细胞2管）	咨询
腹水	指定细胞株生产10mL腹水	1周	离心后10mL腹水	咨询
亚型	应客户要求测定细胞株亚型	1周	测定重链和轻链亚型	咨询
纯化	ProteinA或G纯化10mL腹水	1周	根据亚型选择ProteinA或G	咨询